Επιτάλων(σύνδεσμος:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/epitalon-powder-cas-307297-39-8.html) είναι ένα πεπτιδικό μόριο, το οποίο θεωρείται ότι έχει καλή βιολογική δράση και πιθανή φαρμακευτική αξία. Επί του παρόντος, η έρευνα για το πεπτίδιο epitalon εστιάζεται κυρίως στην εφαρμογή του ως αντιγηραντικού παράγοντα.
Το Epitalon μπορεί να παρατείνει το μήκος των τελομερών στα άκρα των χρωμοσωμάτων ενεργοποιώντας την τελομεράση, επηρεάζοντας έτσι θετικά τον πολλαπλασιασμό και την αναγέννηση των βλαστοκυττάρων. Μελέτες έχουν δείξει ότι το Epitalon μπορεί να αναστείλει σημαντικά το επιβλαβές οξειδωτικό στρες, να μειώσει τη βλάβη του DNA και να ρυθμίσει την έκφραση του αυξητικού παράγοντα που μοιάζει με ινσουλίνη-1 (IGF-1) και τελικά να επιτύχει το αποτέλεσμα της μείωσης της ταχύτητας γήρανση και παράταση της διάρκειας ζωής.
Επιπλέον, το Epitalon έχει επίσης ανοσοτροποποιητικά και νευροπροστατευτικά αποτελέσματα. Το Epitalon μπορεί να ενισχύσει την ανθρώπινη ανοσία και να προωθήσει την αναγνώριση και την κάθαρση από το σώμα ετερογενών και αυτοαντιγόνων. Επιπλέον, το Epitalon μπορεί επίσης να μειώσει τον θάνατο των νευρωνικών κυττάρων και τον νευροεκφυλισμό, επιτυγχάνοντας έτσι νευροπροστατευτικά αποτελέσματα. Το Epitalon έχει επίσης αντικαρκινικά αποτελέσματα και ασκεί τα αποτελέσματά του ρυθμίζοντας τον κυτταρικό κύκλο, προάγοντας την απόπτωση των κυττάρων και αναστέλλοντας τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων.
|
|
|
Το Epitalon είναι ένας ενισχυτής σώματος, μια πολυπεπτιδική ένωση που αποτελείται από τέσσερα αμινοξέα αλανίνη (Ala), γλουταμικό οξύ (Glu), ασπαραγίνη (Asp) και λυσίνη (Lys). Οι μέθοδοι σύνθεσης του Epitalon χωρίζονται κυρίως σε χημική σύνθεση και βιοσύνθεση.
Μέθοδος χημικής σύνθεσης:
Το Epitalon είναι ένα πεπτίδιο που αποτελείται από τέσσερα αμινοξέα με μοριακό τύπο C14H22N4O9. Το Epitalon μπορεί να προάγει την απελευθέρωση της ανθρώπινης αυξητικής ορμόνης, βοηθώντας έτσι στην καθυστέρηση της γήρανσης, στη βελτίωση του ύπνου και στην ενίσχυση της ανοσίας.
1. Παρασκευή αντιδραστηρίου:
Τα αντιδραστήρια για τη σύνθεση του Epitalon περιλαμβάνουν τέσσερα αμινοξέα, αλανίνη (Ala), γλουταμινικό οξύ (Glu), ασπαραγίνη (Asp) και λυσίνη (Lys), καθώς και αντιδραστήρια ακυλίωσης όπως Boc-Lys-OtBu και Asp(OtBu). 2 και ούτω καθεξής. Η καθαρότητα αυτών των αμινοξέων και των αντιδραστηρίων πρέπει να είναι μεγαλύτερη από 99 τοις εκατό, διαφορετικά η ποιότητα του προϊόντος θα επηρεαστεί.
2. Βήματα χημικής σύνθεσης
2.1 Σύνθεση αλανίνης-4-υδροξυβουτυρικού ανυδρίτη (Ala-Hyp):
First, mix alanine (Ala) and 4-hydroxybutyric anhydride (Hyp-OtBu), and carry out acylation reaction with an activator such as DCC, EDC, etc. under anhydrous environment to generate alanine-4-hydroxybutyric anhydride (Ala-Hyp). The final product was white crystals with >95 τοις εκατό καθαρότητα.
2.2 Σύνθεση Ala-Hyp-Glu-OtBu:
The synthesized alanine-4-hydroxybutyric anhydride and glutamic acid-butyrate (Glu-OtBu) were mixed in proportion, and then underwent multiple condensation reactions in anhydrous environment to obtain Ala-Hyp-Glu-OtBu. The final product is a white powder with a purity >95 τοις εκατό
2.3 Σύνθεση του Epitalon:
Προσθέστε Asp(OtBu)2 και Boc-Lys-OtBu στο σύστημα αντίδρασης συμπύκνωσης με τη σειρά που έχει σχεδιαστεί εκ των προτέρων και υποβληθείτε σε πολλαπλές αντιδράσεις συμπύκνωσης για να λάβετε το Epitalon. Η διαδικασία έχει ως εξής:
ένα. Αντίδραση ομάδας αποπροστασίας:
Πρώτον, το Asp(OtBu)2 αποπροστατεύτηκε και η προστατευτική ομάδα του Asp(OtBu)2 αφαιρέθηκε χρησιμοποιώντας υδροξείδιο του νατρίου (NaOH) και τριχλωροξικό οξύ (TCA) για τη δημιουργία δομικών μονάδων Asp και την απελευθέρωση BuOt ταυτόχρονα. Ο χρόνος αντίδρασης ήταν 1 ώρα και η θερμοκρασία ήταν θερμοκρασία δωματίου. Μετά την αντίδραση, πραγματοποιήστε εξουδετέρωση οξέος-βάσης, προσθέστε μια μεγάλη ποσότητα κορεσμένου διαλύματος χλωριούχου νατρίου, στη συνέχεια κατακρημνίστε με αιθανόλη και στεγνώστε υπό κενό για να ληφθεί Asp ως λευκό στερεό.
σι. Αντίδραση συμπύκνωσης:
Προσθέστε Asp και Ala-Hyp-Glu-OtBu στο σύστημα αντίδρασης συμπύκνωσης και, στη συνέχεια, εκτελέστε πολλαπλές αντιδράσεις συμπύκνωσης για να λάβετε το Epitalon. Αυτή η διαδικασία πρέπει να γίνει μέσω διαφορετικών θεραπειών.
Το πρώτο βήμα: αφαιρέστε την ομάδα προστασίας Ala-Hyp:
Αρχικά, το Ala-Hyp-Glu-OtBu διαλύθηκε σε μεθανόλη, προστέθηκε τριχλωροξικό οξύ (TCA) και νερό για να αφαιρεθεί η προστατευτική ομάδα Hyp-OtBu που χρησιμοποιήθηκε για την προστασία της αμινομάδας για τη δημιουργία Ala-Hyp-Glu-OH. Η αντίδραση πρέπει να διεξαχθεί σε θερμοκρασία δωματίου και το διάλυμα αντίδρασης υποβάλλεται σε επεξεργασία με NaOH μετά την αντίδραση για να εξουδετερωθεί η οξύτητα.
Το δεύτερο βήμα: αφαιρέστε την προστατευτική ομάδα Glu-OtBu:
Στη συνέχεια, μετά από πλήρη ξήρανση, το Ala-Hyp-Glu-OH αναμίχθηκε με Boc-Lys-OtBu, προστέθηκαν ξανά τριχλωροξικό οξύ και νερό και η αντίδραση διεξήχθη σε θερμοκρασία δωματίου. Αυτή η αντίδραση αφαιρεί την προστατευτική ομάδα Glu-OtBu για να δημιουργήσει Ala-Hyp-Glu-Lys(Boc)-OtBu.
Το τρίτο βήμα: αφαιρέστε την ομάδα προστασίας Lys:
Τέλος, η προσθήκη τριχλωροξικού οξέος, νερού και μεθανόλης αφαιρεί την προστατευτική ομάδα Boc-Lys-OtBu για να δημιουργήσει το Epitalon. Η αντίδραση πρέπει να διεξαχθεί σε θερμοκρασία δωματίου και το διάλυμα αντίδρασης υποβάλλεται σε επεξεργασία με NaOH μετά την αντίδραση για να εξουδετερωθεί η οξύτητα.
3. Ανάλυση αποτελεσμάτων:
Τελικά λαμβάνεται το προϊόν Epitalon, το οποίο μπορεί να χαρακτηριστεί και να καθαριστεί με διαφορετικές αναλυτικές μεθόδους. Για παράδειγμα, παράμετροι όπως η καθαρότητα, οι ακαθαρσίες και το βάρος μπορούν να προσδιοριστούν χρησιμοποιώντας μεθόδους καθαρισμού όπως η Ευρωπαϊκή Φαρμακοποιία (EP) ή η Φαρμακοποιία των Ηνωμένων Πολιτειών (USP).
4. Περίληψη:
Το Epitalon είναι ένα ενισχυτικό σώματος που αποτελείται από τα τέσσερα αμινοξέα αλανίνη, γλουταμινικό οξύ, ασπαραγίνη και λυσίνη. Η μέθοδος χημικής σύνθεσης του Epitalon περιλαμβάνει κυρίως τη μέθοδο σύνθεσης στερεάς φάσης και τη μέθοδο σύνθεσης υγρής φάσης, οι οποίες πρέπει να συνδέουν διάφορα αμινοξέα μεταξύ τους μέσω αντιδράσεων πολλαπλών σταδίων. Αυτή η διαδικασία απαιτεί προσεκτικό έλεγχο των συνθηκών αντίδρασης και τεχνικών καθαρισμού για την εξασφάλιση προϊόντων υψηλής καθαρότητας.
Βιοσυνθετική μέθοδος:
Η μέθοδος βιοσύνθεσης είναι η χρήση της βιοκατάλυσης μικροοργανισμών ή συνθετικών ενζύμων για την παρασκευή του Epitalon, συμπεριλαμβανομένης της ζύμωσης και της ενζυμικής κατάλυσης.
1. Μέθοδος ζύμωσης: Η μέθοδος ζύμωσης είναι μια βιοσυνθετική μέθοδος που χρησιμοποιεί διαγονιδιακό μικροοργανισμό Escherichia coli για την έκφραση του Epitalon. Πρώτα, βάλτε την αλληλουχία γονιδίου Epitalon στο Escherichia coli και καλλιεργήστε τη μαζικά για έκφραση. Στη συνέχεια, χρησιμοποιούνται διάφορες τεχνικές καθαρισμού όπως η χρωματογραφία ανταλλαγής ιόντων και η χρωματογραφία γέλης για να ληφθούν τελικά καθαρά προϊόντα. Τα συγκεκριμένα βήματα είναι τα εξής:
1.1 Επιλέξτε τα κατάλληλα βακτήρια-ξενιστές:
Προκειμένου να συντεθεί το Epitalon, είναι απαραίτητο να επιλεγεί ένα κατάλληλο στέλεχος ξενιστή για έκφραση. Τα συνήθως χρησιμοποιούμενα βακτήρια-ξενιστές περιλαμβάνουν το Escherichia coli (Escherichia coli), τη ζύμη (Saccharomyces cerevisiae) και τους μύκητες (Aspergillus oryzae). Κατά την επιλογή βακτηρίων ξενιστών, είναι απαραίτητο να ληφθεί υπόψη εάν τα βακτήρια ξενιστές έχουν την ικανότητα να συνθέτουν αποτελεσματικά πρωτεΐνες, εάν μπορούν να διπλώσουν και να τροποποιήσουν σωστά τις πρωτεΐνες και εάν μπορούν να παράγουν προϊόντα-στόχους υψηλής απόδοσης.
1.2 Σχεδιασμός γονιδιακής αλληλουχίας και κλώνου:
Αφού επιλεγούν τα βακτήρια-ξενιστές, η αλληλουχία γονιδίου Epitalon (συμπεριλαμβανομένων των αλληλουχιών αλανίνης, γλουταμινικού οξέος, ασπαραγίνης και βάσεων λυσίνης) πρέπει να εισαχθεί στα βακτήρια ξενιστή μέσω της τεχνολογίας ανασυνδυασμού DNA. Τυπικά, η αλληλουχία γονιδίου κλωνοποιείται σε φορέα έκφρασης που περιλαμβάνει στοιχεία όπως αλληλουχίες προαγωγέα και τερματιστή και έναν επιλέξιμο αντιβιοτικό δείκτη.
1.3 Έκφραση και κάθαρση:
Αφού ολοκληρωθεί η κλωνοποίηση, ο φορέας έκφρασης μετασχηματίζεται στα βακτήρια-ξενιστές και στη συνέχεια καλλιεργείται. Κατά τη διάρκεια της διαδικασίας καλλιέργειας, τα βακτήρια-ξενιστές θα συνθέσουν το Epitalon σύμφωνα με τη γονιδιακή αλληλουχία στον φορέα έκφρασης. Μόλις το προϊόν παραχθεί σε επαρκή ποσότητα, μπορεί να απομονωθεί από τα κύτταρα με διαφορετικές μεθόδους καθαρισμού και λαμβάνεται Epitalon υψηλής καθαρότητας.
2. Μέθοδος που καταλύεται από ένζυμα: Η μέθοδος που καταλύεται από ένζυμα είναι η σύνθεση του Epitalon συνδέοντας διαφορετικά αμινοξέα με διάφορα ένζυμα. Για παράδειγμα, η L-γλουταμινική-5-αμινάση χρησιμοποιείται για την κατάλυση της αντίδρασης γλουταμικού και βουτυρικού για τη σύνθεση Glu-OtBu. Στη συνέχεια, χρησιμοποιήστε L-ασπαραγινάση για να καταλύσετε την αντίδραση συμπύκνωσης της ασπαραγίνης και του Ala-Hyp-Glu-OtBu για να λάβετε το Epitalon.
Οι μέθοδοι σύνθεσης του Epitalon χωρίζονται κυρίως σε χημική σύνθεση και βιοσύνθεση. Η χημική σύνθεση είναι σήμερα η πιο συχνά χρησιμοποιούμενη μέθοδος σύνθεσης Epitalon. Η βιοσύνθεση είναι η παρασκευή του Epitalon μέσω της βιοκατάλυσης μικροοργανισμών ή συνθετικών ενζύμων, συμπεριλαμβανομένης της ζύμωσης και της ενζυμικής κατάλυσης. Αν και οι βιοσυνθετικές μέθοδοι έχουν μεγάλες δυνατότητες, απαιτείται περαιτέρω έρευνα και βελτιστοποίηση. Το Epitalon είναι ένα πιθανό φάρμακο με ευρείες προοπτικές εφαρμογής, το οποίο μπορεί να χρησιμοποιηθεί στους τομείς της αντιγήρανσης, της ανοσολογικής ρύθμισης, της νευροπροστασίας και της θεραπείας του καρκίνου. Ταυτόχρονα, το Epitalon μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί ως προϊόν υγιεινής διατροφής και υγειονομικής περίθαλψης για να βοηθήσει τους καταναλωτές να αντισταθούν στη γήρανση, να ενισχύσουν την ανοσία και να μειώσουν τον κίνδυνο ασθενειών. Παρόλο που η έρευνα για το Epitalon βρίσκεται ακόμη στα σπάργανα, πιστεύεται ότι με τη εις βάθος έρευνα για τον μηχανισμό και τη λειτουργία του, το Epitalon θα γίνει ένα σημαντικό φάρμακο και προϊόν υγειονομικής περίθαλψης.