Pentagastrin CAS 5534-95-2

Ακολουθία στόχου: Boc- -Ala-Trp-Met-Asp-Phe-NH2. Υιοθετείται η στρατηγική διαδοχικής συμπύκνωσης AC-σε-Ν τερματικού, με το L-φαινυλαλανιναμίδιο να χρησιμεύει ως το C-τελικό αρχικό υλικό.

Εφαρμόζεται εκλεκτική προστασία πλευρικής-αλυσίδας για μεμονωμένα αμινοξέα: η -καρβοξυλομάδα του ασπαρτικού οξέος προστατεύεται μέσω βενζυλεστεροποίησης, το τμήμα ινδόλης της τρυπτοφάνης υφίσταται ήπια κάλυψη και το Boc χρησιμοποιείται για παροδική θωράκιση αμινο{{2}.

Χρησιμοποιώντας το κλασικό DCC/HOBt ως αντιδραστήρια συμπύκνωσης, η σύζευξη προχωρά σε χαμηλή θερμοκρασία σε DMF, με διαδοχική ενσωμάτωση των Asp, Met και Trp, ακολουθούμενη από τελική σύζευξη με Boc- -αλανίνη.

Η υδρογονόλυση μετά τη{0}}συμπύκνωση,-χαμηλή θερμοκρασία αφαιρεί τις προστατευτικές ομάδες πλευρικής-αλυσίδας με βάση το βενζύλιο και οι υπολειμματικές ομάδες Boc διασπώνται υπό ήπια επεξεργασία TFA.

Το συμπυκνωμένο ακατέργαστο προϊόν ανακρυσταλλώνεται από ένα σύστημα ακετονιτριλίου-μεικτού νερού. Διαθέτοντας χαμηλή επένδυση κεφαλαίου σε εξοπλισμό παραγωγής, αυτή η διαδικασία υιοθετήθηκε ευρέως για την πρώιμη χύδην παρασκευή φαρμάκων με συνολική απόδοση που κυμαίνεται από 32% έως 38%. Στα κύρια μειονεκτήματά του περιλαμβάνονται η δυσκίνητη ενδιάμεση απομόνωση και η υπερβολική απόρριψη απορριμμάτων, που οδηγεί σε σταδιακή αντικατάσταση από τεχνολογία σύνθεσης στερεάς-φάσης.

Ως στερεό στήριγμα επιλέγεται 2-ρητίνη χλωροτριτυλ χλωριδίου (CTC ρητίνη). Το Fmoc-Phe-NH2 αγκυρώνεται πρώτα στη μήτρα της ρητίνης και οι μη κατειλημμένες θέσεις αντιδραστικής ρητίνης καλύπτονται με μεθανόλη.

Με το DMF ως μέσο αντίδρασης, η αποπροστασία Fmoc ολοκληρώνεται με χρήση πιπεριδίνης και η ενεργοποίηση καρβοξυλίου πραγματοποιείται με HBTU/HOBt. Τα Fmoc-Asp(OBzl), Fmoc-Met και Fmoc-Trp συνδέονται διαδοχικά από το άκρο C- προς το τερματικό N- και το τερματικό Boc- -Ala (δωρεάν Fmoc-) εισάγεται στο τελικό βήμα.

Η διάσπαση από τη ρητίνη και η ολική πλευρική-αποπροστασία της αλυσίδας πραγματοποιούνται σε θερμοκρασία περιβάλλοντος με κοκτέιλ διάσπασης TFA. η ρητίνη απομακρύνεται με διήθηση και το συμπυκνωμένο διήθημα υποβάλλεται σε προπαρασκευαστικό καθαρισμό με HPLC αντίστροφης- φάσης σε στήλη C18 με βαθμιδωτή έκλουση ακετονιτριλίου-νερού, που ακολουθείται από λυοφιλοποίηση για να αποδώσει υψηλής{{4}καθαρότητας χύδην φαρμακευτική ύλη και μεγαλύτερη καθαρότητα9 από % ίση με 5 έως 5% ολική πρώτη ύλη. 52% και 60%.

Αυτή η μέθοδος διαθέτει ελάχιστες παρενέργειες και άμεσο καθαρισμό, σύμφωνα με τις προδιαγραφές κατασκευής για τα ενεργά φαρμακευτικά συστατικά της φαρμακοποιίας-. Τα τελευταία χρόνια, οι βελτιστοποιημένες{2}}οικολογικές διαδικασίες που υιοθετούν-αντιδραστήρια διάσπασης χωρίς φθόριο μείωσαν δραστικά τη ρύπανση των αποβλήτων-του νερού και έχουν γίνει η προτιμώμενη τεχνολογία παραγωγής για τους κατασκευαστές φαρμακευτικών προϊόντων παγκοσμίως.

Το 1905, ο Βρετανός φυσιολόγος Edkins υπέβαλε την υπόθεση ότι ο βλεννογόνος της κοιλίας του άντρου εκκρίνει γαστρίνη, έναν χυμικό παράγοντα που ρυθμίζει την παραγωγή οξέος του στομάχου μέσω της κυκλοφορίας του αίματος.

Περιορισμένη από ανεπαρκείς τεχνολογίες καθαρισμού, αυτή η υπόθεση παρέμεινε αμφιλεγόμενη και αναπόδεικτη για σχεδόν μισό αιώνα. Το 1926, ο Κινέζος φυσιολόγος Lin Kesheng επικύρωσε την ύπαρξη γαστρεντερικών ενδοκρινικών ουσιών μέσω πειραμάτων σε ζώα και συμπλήρωσε το φυσιολογικό πλαίσιο της υπόθεσης της γαστρίνης, ωστόσο η φυσική μονομερής γαστρίνη δεν απομονώθηκε.

Μόλις το 1959 οι Gregory και Tracy από το Πανεπιστήμιο του Liverpool, UK, καθάρισαν το φυσικό επταδεκαπεπτίδιο γαστρίνη G17 από τον βλεννογόνο του άντρου χοίρου χρησιμοποιώντας αντιρροή κατανομής και χρωματογραφία γέλης Sephadex. Η επαλήθευση της όξινης-διεγερτικής του δραστηριότητας έθεσε στέρεα χημικά και φυσιολογικά θεμέλια για την έρευνα για τη γαστρίνη.

Το 1964, η ίδια ερευνητική ομάδα ολοκλήρωσε τον πλήρη προσδιορισμό της αλληλουχίας αμινοξέων του G17. Η τμηματική σύνθεση και ο έλεγχος επιβεβαίωσαν ότι το C{2}}τελικό τετραπεπτίδιο Trp-Met-Asp-Phe-NH2 αποτελεί τον φαρμακοφορικό πυρήνα, διατηρώντας πλήρως τον υποδοχέα γαστρίνης της φυσικής γαστρίνης, καθώς και τη μακροχρόνια δράση του οξέος{8} Η Ν-τελική αλυσίδα αμινοξέων ρυθμίζει μόνο τον in vivo μεταβολισμό χωρίς ουσιαστική φαρμακολογική λειτουργία.

Στο πλαίσιο της επείγουσας κλινικής ζήτησης για τυποποιημένα διαγνωστικά αντιδραστήρια για τη λειτουργία του στομαχικού οξέος και του υψηλού κόστους και της περιορισμένης προσφοράς εξαγόμενου φυσικού επταδεκαπεπτιδίου, η ICI Pharmaceuticals συνεργάστηκε με φυσιολογικούς ερευνητές για να ξεκινήσει ένα αναπτυξιακό έργο.

Με τη σύζευξη της Boc-προστατευμένης -αλανίνης στο αμινοτελικό άκρο του ενεργού τετραπεπτιδίου, κατασκευάστηκε ένα πιο σταθερό πενταπεπτιδικό παράγωγο για να ανθίσταται στην ταχεία ενζυματική υδρόλυση in vivo.

Πλήρης χημική σύνθεση τουπενταγαστρίνηολοκληρώθηκε από την ερευνητική ομάδα του Konturek το 1967, με δοκιμασίες in vitro και σε ζώα που επιβεβαιώνουν την όξινη-εκκριτική ισχύ του ισοδύναμη με τη φυσική γαστρίνη. Ο αντιπρόσωπος έλαβε έγκριση μάρκετινγκ στην Ευρώπη την ίδια χρονιά και έκτοτε έχει γίνει το χρυσό-πρότυπο αντιδραστήριο για τη δοκιμή παραγωγής οξέος στομάχου.

Μεταγενέστερες εγκρίσεις χορηγήθηκαν στις Ηνωμένες Πολιτείες, την Ιαπωνία και την Κίνα για τον έλεγχο του γαστρινώματος και την αξιολόγηση της λειτουργίας των βρεγματικών κυττάρων. Ξεκινώντας από τη δεκαετία του 1990, η εφαρμογή του επεκτάθηκε στη θεμελιώδη έρευνα ως ένωση φαρμακολογικού εργαλείου που στοχεύει τον υποδοχέα CCK-Β και παραμένει μέχρι σήμερα μια κλασική ένωση αναφοράς στη φαρμακολογία του πεπτικού συστήματος.